真菌培养基的介绍说明

      一、沙保罗琼脂培养基

     ⒈用途

     供真菌及酵母样真菌的分离培养用.

     ⒉配法

     麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g,蒸馏水1L.              

     将上述成分溶于水,加热溶解,调pH至6.0±0.2,分装三角瓶或试管中,118℃灭菌15min,倾注平板或置斜面,无菌试验后备用.

     ⒊用法

     将标本接种培养基,如系血液标本,则采取1～2ml,与冷却至45℃左右沙保琼脂混合,倾注接种平板.分别置35℃和25℃恒温箱内同时培养.35℃培养48h,25℃需连续培养5天,逐日观察结果.发现真菌及酵母样可疑菌落,转种沙保菌斜面,获得纯培养后进行鉴定.

     ⒋质量控制

     白色念珠菌和新型隐球菌生长良好.

     注：

     ⑴ 本培养基如不加入琼脂,即为沙保罗液体培养基,供真菌及念珠菌的增菌培养用.

     ⑵ 增加氯霉素0.05～0.125mg/ml或放线菌酮0.5mg/ml,可抑制细菌和污染的霉菌及隐球菌生长.此二种药均耐热,可直接加入培养基内高压灭菌.

     ⑶ 添加酵母浸膏5mg/ml,可促进皮肤癣菌生长.增加维生素B 0.1mg/ml,可促进紫色癣菌和断发癣菌生长.

     ⑷ 将麦芽糖减少到20g/L,为沙保罗20g/L麦芽糖琼脂培养基,可供诱导真菌产生孢子用.

     ⑸ 该培养基呈酸性,应提高20%的琼脂用量.

     二、玉米粉琼脂培养基

    ⒈用途

    鉴定酵母样真菌用.白色念珠菌在该培养基上25℃24h培养可长出假菌丝,顶端有典型的厚壁孢子,可与其它念珠菌鉴别.

    ⒉配法

    玉米粉4g,琼脂粉8g,蒸馏水1L

   （pH6.0±0.2）.

    将细米粉加水浸泡数分钟,扎紧瓶口,浸入60℃水浴4h,取出后用沙布过滤,除去粗渣,补足水分.无须调整pH.加入琼脂,煮沸溶解,有沉淀物再过滤1次,分装试管,121℃灭菌15min备用.

    用玻璃片法点种后,置平皿内,保持一定湿度,置23～26℃下培养24～48h.取出玻片培养物,用高倍镜观察真假菌丝和有无厚壁孢子.

    ⒊质量控制

    白色念珠菌（[**]TCC 26790）厚膜孢子阳性；新型隐球菌（[**]TCC 9763）厚膜孢子阴性.

    注：

    ⑴ 玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉代替,效果相同.

    ⑵ 该培养基加入10ml/L Tween-80,制成玉米粉Tween-80琼脂,用途相同,效果更好.