邻伞花烃 -5- 醇是一种可接触黏膜的广谱高效杀菌剂，具有杀菌、消炎、止汗、防臭等功效，被广泛用于化妆品、牙膏以及医用制药等产品中。《化妆品安全技术规范》(2015 年版 ) 中规定，邻伞花烃 -5- 醇在化妆品中使用的最大允许含量为0.1%。在化妆品中过量添加邻伞花烃 -5- 醇可能会给消费者的健康和安全造成潜在危害。因此对化妆品中邻伞花烃 -5- 醇含量的准确测定具有十分重要的意义。

  目前针对邻伞花烃 -5- 醇的检测方法主要有高效液相色谱法和气相色谱 – 质谱联用法等。气相色谱 – 质谱联用法因其定性方面的优势，常用于植物挥发油中邻伞花烃 -5- 醇的测定，但气相色谱 – 质谱联用仪的仪器长期稳定性不如高效液相色谱仪，且定量准确性容易受到基质的干扰。高效液相色谱法具有简单、准确、稳定和重复性好等优点，是检测化妆品中防腐剂类物质最常用的方法之一。由于化妆品基质成分复杂，有必要对不同类型化妆品进行考察，但目前尚未有高效液相色谱法测定不同类型化妆品中邻伞花烃 -5- 醇的报道。笔者建立高效液相色谱法测定不同类型化妆品中邻伞花烃 -5- 醇的含量，该法操作简便，结果准确、可靠，以期为生产企业把控产品质量，保障消费者的健康安全提供技术支持。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

  高效液相色谱仪：[**]gilent 1260 型，配有二极管阵列检测器，美国安捷伦科技有限公司；

  涡旋混匀器：MS3 digital 型，德国艾卡公司；超声清洗器：SK8200HP 型，上海科导超声仪器有限公司；

  台式高速冷冻离心机：3K15 型，德国希格玛公司；电子分析天平：BS[**]224S 型，精度为 0.1 mg，德国赛多利斯公司；

  邻伞花烃 -5- 醇标准品：纯度为 99.9%，C[**]S 号为 3228–02–2，德国 Dr.Ehrenstorfer 公司；

  甲醇、乙腈：色谱纯，美国斯百全公司；

  实验用水为超纯水，电阻率为 18.2 MΩ · cm。

1.2 溶液的制备

准确称取 10 mg（精确至 0.01 mg）邻伞花烃 -5-醇标准品于 10 mL 容量瓶中，加入甲醇配制成 1 000 mg／L 的标准储备溶液。精密移取适量标准储备溶液，用甲醇配制成邻伞花烃 -5- 醇的质量浓度分别为 1.0，2.0，5.0，10.0，20.0，50.0，100.0 mg／L 的系列标准工作溶液。

1.3 样品前处理

  称取 1 g（精确至 0.1 mg）样品至 10 mL 具塞比色管中，用甲醇稀释至标线，涡旋混匀后超声 15 min（当溶液中的颗粒影响过滤时，取适量于 10 000r／min 离心 5 min），经 0.22 μm 滤膜过滤，备用。

1.4 色谱条件

色 谱 柱：X-bridge C18 柱 (250 mm×4.6 mm，5μm，美国沃特世公司 ) ；检测器：D[**]D ；检测波长：280 nm ；柱温：30℃；流动相：乙腈 – 水 ( 体积比为60∶40) ；流量：1.0 mL／min ；进样体积：10 μL。

2 结果与讨论

2.1 提取溶剂的选择

  根据邻伞花烃 -5- 醇的结构以及理化性质，对提取溶剂进行了考察。邻伞花烃 -5- 醇具有一定的脂溶性 ( 其 LogP 值为 3.28)，分别考察了甲醇、乙腈、丙酮作为提取溶剂测定样品溶液中邻伞花烃 -5- 醇的含量。结果表明，采用甲醇作为提取溶剂的加标回收率在 90% 以上，且检测结果的重现性较好，因此选择甲醇作为样品提取溶剂。

2.2 色谱条件的选择

2.2.1 检测波长的选择

于 210～340 nm 波长范围内对邻伞花烃 -5- 醇进行扫描，邻伞花烃 -5- 醇的紫外吸收光谱图见图1。 由 图 1 可 知，邻 伞 花 烃 -5- 醇 于 220 nm 和 280 nm 处均有特征吸收，其中于 220 nm 处有最大紫外吸收波长。在实际样品测试过程中，虽然摩尔吸收系数 ε 220 nm 大于 ε 280 nm，但于 220 nm 波长下样品中基质成分带来的干扰较大。考虑到邻伞花烃 -5-醇于 280 nm 波长处的响应值能满足方法灵敏度的要求，故选择 280 nm 作为检测波长。

2.2.2 色谱柱的选择

  参照文献分别考察了 (X-bridge C₁₈，ZORB[**]X Eclipse XDB–C₁₈，ZORB[**]X SB–C₁₈，Ultimate [**]Q C₁₈ 和 Dimansil C₁₈)5 种 不 同 品 牌、相 同 规 格 (250 mm×4.6 cm，5 μm) 的色谱柱对邻伞花烃 -5- 醇和样品基质的分离效果。结果表明，X-bridge C₁₈ 柱能实现邻伞花烃 -5- 醇和样品基质的有效分离，且峰形最好。因此采用 X-bridge C18 柱作为分离色谱柱。邻伞花烃 -5- 醇标准溶液及阳性样品在 X-bridge C₁₈柱上的分离色谱图见图 2。

2.2.3 流动相的选择

  采用 Waters X-bridge C₁₈ 柱的基础上，分别比较了甲醇 – 水溶液和乙腈 – 水溶液两种流动相体系对邻伞花烃 -5- 醇和样品基质的分离效果。结果表明，在乙腈 – 水溶液流动相体系下，采用等度洗脱，邻伞花烃 -5- 醇具有良好的保留效果和峰形，且与样品基质具有良好的分离效果，因此采用乙腈 – 水 ( 体积比为 60∶40) 作为流动相。

2.3 线性方程与检出限

  在 1.4 色谱条件下对系列标准工作溶液进行测定。以色谱峰面积（y）为纵坐标，邻伞花烃 -5- 醇的质量浓度（x）为横坐标绘制标准工作曲线。以 3 倍信噪比 (S／N=3) 计算方法检出限，以 10 倍信噪比 (S／N=10) 计算定量限。线性范围、线性方程、相关系数、检出限和定量限见表 1。

由 表 1 可 知，邻 伞 花 烃 -5- 醇 的 质 量 浓 度 在1.0～100.0 mg／L 范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系，相关系数为 0.9999，检出限为 3.0 mg／kg，定量限为 10.0 mg／kg。

2.4 精密度试验及加标回收试验

  选用化妆水、洁面乳和美白霜 3 种空白化妆品为加标基质，按 1.3 方法进行处理，分别加入低、中、高 3 个水平的邻伞花烃 -5- 醇标准溶液，在 1.4 色谱条件下平行测定 6 次，测定结果见表 2。由表 2 可知，样品加标回收率为 93.7%～98.0%，测定结果的相对标准偏差为 1.20%～2.09%，表明该法具有良好的准确度和精密度，满足分析要求。

3 结语

  建立了高效液相色谱法测定化妆品中邻伞花烃 -5- 醇的含量。该法操作简便，重复性好，灵敏度高，为技术规范的实施及化妆品产品质量的控制提供了有力的技术支持，对规范化妆品中防腐剂的使用及保障消费者的健康安全有着积极的意义。