定向进化技术是改造酶催化特性(如平面/区域/化学选择性、活性、热稳定性等)的有效手腕。前期研讨证明,对位于酶催化口袋的氨基酸残基停止饱和突变(SM)可胜利控制酶的选择性和活性。作为常用的简并密码子,NNK可编码20种氨基酸,但随着突变位点的增加,挑选量呈指数级增长(20m,m为位点数目)。如何经过精简密码子设计并构建高效突变体文库,从而克制挑选瓶颈遭到越来越多的关注。
中国科学院天津工业生物技术研讨所研讨员孙周通率领的酶分子工程与工业生物催化研讨团队盘绕这一难题,以柠檬烯环氧水解酶和P450单加氧酶为研讨对象,分别用NNK、NDT、理性设计的精简密码子等多种简并密码子设计办法构建突变体文库,实验结果标明,在相同挑选量下理性设计的精简密码子取得有益突变体数量显着增高,并基于统计学(Patrick/Firth及Nov计算)剖析得到理论支持。该工作初次证明,精简密码子设计与高掩盖度的挑选可快速取得有益突变体,文章发表于期刊[**]CS Catalysis。
该研讨得到中科院项目赞助,天津工生所助理研讨员曲戈为论文共同第一作者,孙周通及德国马普煤炭所/天津工生所教授Manfred T. Reetz为共同通讯作者。
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